ในฐานะที่เป็นวัสดุเสริมในการทดลองการตรวจหา ELISA เอนไซม์ จาน มีบทบาทชี้ขาดและส่งผลโดยตรงต่อผลการทดลองขั้นสุดท้าย คุณภาพของ แผ่นเอ็นไซม์ ส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับความไวต่อการดูดซับโปรตีน ความแตกต่างของความสามารถในการดูดซับโปรตีนระหว่างแผ่นและรู และความแตกต่างระหว่างแบทช์ของสินค้าที่ซื้อ แผ่นเอนไซม์ . ดังนั้นการเลือก แผ่นเอนไซม์ ผลิตภัณฑ์ที่มีความไวในการดูดซับโปรตีนสูง ความแตกต่างเล็กน้อยระหว่างรูของความสามารถในการดูดซับโปรตีน และความแตกต่างเล็กน้อยระหว่างแบทช์คือการรับประกันสำหรับผู้ทดลองว่าจะได้ผลการทดลองที่น่าเชื่อถือและมีเสถียรภาพ

แผ่นเอ็นไซม์ การจำแนกประเภท: ตามมาตรฐานการจำแนกประเภทที่แตกต่างกัน จานมี การจำแนกประเภทต่างๆ

1: ตามจำนวนหลุมสามารถแบ่งออกเป็น 96 หลุม 48 หลุม เป็นต้น เนื่องจาก แผ่นเอนไซม์ ส่วนใหญ่จะใช้กับเครื่องอ่านไมโครเพลท, the จาน เมตรในท้องตลาดมีรูสูงสุด 96 รู ดังนั้นไมโครเพลทจึงมี 96 รู

2: ตามพื้นที่แตกต่างกันจะแบ่งออกเป็นด้านล่างแบน, ด้านล่าง U, ด้านล่าง V ฯลฯ

ดัชนีหักเหของฐานแบนต่ำ ซึ่งเหมาะสำหรับการตรวจจับในไมโครเพลท

ต ดัชนีการหักเหของแสงไมโครเพลท U สูง สะดวกสำหรับการสุ่มตัวอย่าง การสุ่มตัวอย่าง และการผสม และสามารถสังเกตการเปลี่ยนสีได้โดยตรงโดยไม่ต้องวางบนไมโครเพลท เพื่อตรวจสอบว่ามีปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันที่สอดคล้องกันหรือไม่

ไมโครเพลทของฐาน V สามารถดูดซับตัวอย่างได้อย่างแม่นยำ

3: ตามความสามารถในการจับที่แตกต่างกันของไมโครเพลทและโปรตีนและโมเลกุลอื่นๆ จะแบ่งออกเป็นแรงยึดเกาะสูง แรงยึดเกาะปานกลาง และอะมิเนชัน

(1) แรงยึดเกาะสูง

หลังจากพื้นผิวของไมโครเพลทนี้ ความสามารถในการจับกับโปรตีนจะเพิ่มขึ้นอย่างมาก โดยสูงถึง 300~400ng IgG / cm2 และน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนจับหลักคือ> 10 kD การใช้ไมโครเพลทประเภทนี้สามารถปรับปรุงความไว และสามารถลดความเข้มข้นและปริมาณของโปรตีนที่เคลือบได้ ซึ่งทำให้เกิดปฏิกิริยาที่ไม่เฉพาะเจาะจงได้ง่ายกว่า หลังจากการเคลือบด้วยแอนติเจนหรือแอนติบอดี สารซักฟอกที่ไม่มีประจุไฟฟ้าไม่สามารถปิดผนึกตำแหน่งของโปรตีนที่หลุดออกได้อย่างมีประสิทธิภาพ และควรใช้โปรตีนเป็นสารเคลือบหลุมร่องฟัน

(2) แรงยึดปานกลาง

แผ่นไมโครเพลทดังกล่าวจับกับโปรตีนแบบพาสซีฟผ่านพันธะที่ไม่ชอบน้ำบนพื้นผิว และเหมาะเป็นตัวพาโซลิดเฟสสำหรับโปรตีนโมเลกุลขนาดใหญ่ที่มีน้ำหนักโมเลกุลมากกว่า 20 kD โดยมีความสามารถในการจับโปรตีนที่ 200 ถึง 300 ng IgG / cm2 เนื่องจากลักษณะเฉพาะของการจับกับโมเลกุลขนาดใหญ่เท่านั้น จึงเหมาะสำหรับตัวพาโซลิดเฟสเป็นแอนติบอดีหรือแอนติเจนที่ไม่บริสุทธิ์เพื่อลดโอกาสเกิดปฏิกิริยาข้ามที่ไม่จำเพาะเจาะจง แผ่นเพลทอาจเป็นโปรตีนเฉื่อยหรือสารซักฟอกที่ไม่มีประจุเป็นสารละลายสำหรับปิดผนึก

(3) อะมิเนท

ไมโครเพลทนี้หลังจากการปรับเปลี่ยนพื้นผิวจะมีหมู่อะมิโนที่มีประจุบวก ซึ่งพันธะที่ไม่ชอบน้ำจะถูกแทนที่ด้วยพันธะที่ชอบน้ำ ไมโครเพลทประเภทนี้เหมาะสำหรับเป็นตัวพาโซลิดเฟสสำหรับโปรตีนโมเลกุลขนาดเล็ก การใช้บัฟเฟอร์และ pH ที่เหมาะสม พื้นผิวจะจับกับโมเลกุลขนาดเล็กที่มีประจุลบผ่านพันธะไอออนิก เนื่องจากคุณสมบัติที่ชอบน้ำของพื้นผิวและความสามารถในการจับตัวกันแบบโควาเลนต์กับตัวเชื่อมขวางอื่นๆ จึงสามารถใช้ตรึงโมเลกุลโปรตีนที่ละลายได้ในสารปนเปื้อน เช่น Triton-100, Tween 20 เป็นต้น ข้อบกพร่องของเพลตนี้คือ เนื่องจากความสามารถในการไม่ชอบน้ำลดลง นอกจากนี้ยังต้องปิดพื้นผิวอย่างมีประสิทธิภาพ เนื่องจากคุณสมบัติพื้นผิวที่ชอบน้ำและโควาเลนต์ สารละลายปิดผนึกที่ใช้ต้องสามารถโต้ตอบกับหมู่ฟังก์ชันใดๆ ในกลุ่มอะมิโนที่ไม่ทำปฏิกิริยาและตัวเชื่อมขวางที่เลือก

4. ตามสีสามารถแบ่งออกเป็นโปร่งใส, ดำและขาว

แบบโปร่งใสใช้กันมากที่สุดสำหรับการทดลองการสร้างภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์โดยทั่วไป ใน Relcontrast กับไมโครเพลทแบบโปร่งใส ยังมีไมโครเพลทแบบทึบสำหรับการตรวจจับแบบเรืองแสง โดยทั่วไปจะเป็นสีดำและขาว ไมโครเพลทสีดำเองมีการดูดกลืนแสง ดังนั้นสัญญาณของไมโครเพลทจึงต่ำกว่าไมโครเพลทสีขาวมาก ดังนั้นจึงมักใช้ในการตรวจจับแสงจ้า เช่น การตรวจจับการเรืองแสง ไมโครเพลทสีขาวใช้สำหรับการตรวจจับแสงอ่อน ซึ่งมักใช้สำหรับเคมีเรืองแสงทั่วไป นอกจากนี้ ไมโครเพลทสีดำยังสามารถทำให้ปัญหาของปฏิกิริยาที่ไม่เฉพาะเจาะจงลดลงได้อีกด้วย ในเวลาเดียวกัน สิ่งสำคัญคือต้องสังเกตว่าด้วยไมโครเพลททั่วไปไม่สามารถตรวจจับการส่องสว่างได้ เนื่องจากแสงที่ปล่อยออกมาจากปฏิกิริยาเคมิลูมิเนสเซนซ์เป็นแบบไอโซโทรปิก หากใช้ไมโครเพลทแบบโปร่งใส แสงจะไม่กระจายจากทิศทางแนวตั้งเท่านั้น แต่ยังมาจากทิศทางแนวนอน ทำให้แสงผ่านช่องว่างระหว่างรูและผนังรูได้ง่าย ส่งผลให้แสงของค่าการดูดกลืนแสงของรูได้รับผลกระทบจากแสงที่ปล่อยออกมาจากรูที่อยู่ติดกัน

ไมโครเพลทที่ดีควรมีประสิทธิภาพการดูดซับที่ดี ค่าช่องว่างต่ำ ความโปร่งใสสูงของก้นหลุม และประสิทธิภาพที่คล้ายคลึงกันระหว่างเพลตและระหว่างรูของเพลตเดียวกัน เนื่องจากความแตกต่างของวัตถุดิบและความแตกต่างในกระบวนการผลิต คุณภาพของผลิตภัณฑ์ต่างๆ จึงแตกต่างกันมาก ดังนั้นจึงต้องตรวจสอบประสิทธิภาพของไมโครเพลทแต่ละชุดล่วงหน้าก่อนใช้งาน วิธีการตรวจสอบที่ใช้กันโดยทั่วไปคือความเข้มข้นของ IgG ของมนุษย์ (โดยทั่วไปคือ 10 ng/ml) ที่เคลือบด้วยหลุมจาน ELISA หลังจากการล้าง เติมการเจือจางที่เหมาะสมของแอนติบอดีต่อต้าน IgG ของมนุษย์ที่ติดป้ายชื่อเอนไซม์ลงในแต่ละหลุม การล้างหลังการเก็บรักษาความร้อน การเติมสีสารตั้งต้น หยุดปฏิกิริยาของเอนไซม์ และวัดค่าการดูดกลืนแสงของสารละลายในแต่ละหลุมตามลำดับ สภาวะของปฏิกิริยาถูกควบคุมเพื่อให้การอ่านค่าของแต่ละหลุมถูกเก็บไว้ที่ค่าการดูดกลืนแสงประมาณ 0.8 คำนวณค่าเฉลี่ยของการอ่านทั้งหมด ความแตกต่างระหว่างค่าเฉลี่ยของการอ่านแต่ละครั้งและการอ่านทั้งหมดจะต้องน้อยกว่า 10% ไมโครเพลทสามตัวต่อไปนี้คือตัวอย่าง A, B และ C

วิธีการโดยตรง: เพื่อตรวจหาการดูดซับของ Human IgG บนพื้นผิวของไมโครเพลท

วิธีดับเบิ้ลแอนติบอดีแบบแซนด์วิช: แอนติเจนในซีรั่มให้ผลบวกต่อแอนติบอดีต่อต้านมนุษย์

ดังที่เห็นได้จากรูปด้านบน ในแผ่นเอนไซม์ชีวภาพทั้งสามประเภทนี้ ไมโครเพลทคลาส A มีผลในการดูดซับโปรตีนที่ดีกว่า แต่ยังปรับปรุงความไวของการดูดซับโปรตีน ซึ่งสามารถให้ข้อมูลการทดลองที่เชื่อถือได้มากขึ้น นอกจากนี้ คุณสามารถถามเกี่ยวกับแผ่นความแตกต่างของแบทช์ ต่อไปนี้คือความแตกต่างของแบทช์ของเพลตหนึ่งๆ ดังที่เห็นได้จากแผนภูมิข้อมูลความแตกต่างภายในแบทช์ ไมโครเพลทมีความเสถียรระหว่างแบทช์ดี และค่าสัมประสิทธิ์การแปรผัน (CV) ภายในแบทช์อยู่ที่ประมาณ 5.0% ซึ่งต่ำกว่าค่าสัมประสิทธิ์การแปรผันภายในแบทช์อย่างมาก ต่ำกว่า 10.0% ในมาตรฐานการควบคุมคุณภาพสำหรับปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันทางคลินิก ดังนั้นจึงเหมาะสำหรับการทดลอง ELISA ด้วยเช่นกัน